Aquaporines et membranes foetales chez la parturiente diabétique : Anomalies d'expression et régulation par l'insuline.

Résumé : Pendant la grossesse, les aquaporines (AQPs) exprimées au sein des membranes fœtales sont essentielles pour assurer l’homéostasie du volume de liquide amniotique (LA), mais leur régulation par l’insuline n’a jamais été explorée chez les femmes diabétiques.Le but de notre étude était de préciser le rôle des AQPs 1, 3, 8 et 9 au sein des membranes fœtales chez des parturientes diabétiques et d’étudier la régulation de leur expression par l’insuline.A partir des 129 membranes fœtales, réparties selon 4 populations (36 témoins, 35 diabètes de type 1 (DT1), 17 diabètes de type 2 (DT2) et 41 diabètes gestationnels (DG)), nous avons établi un profil d’expression qualitatif et quantitatif des gènes des AQPs. Dans un second temps, nous avons étudié la régulation par l’insuline de l’expression des AQPs 3 et 9 au sein d’explants d’amnion et de chorion. L’expression ARN et protéique des AQPs au sein de nos différents fragments de membranes fœtales a été étudiée par RT-PCR quantitative et ELISA. Des membranes fœtales issues de grossesses non pathologiques, séparées en ses 2 feuillets (amnion et chorion), ont été utilisées pour étudier la régulation de l’expression des gènes des AQPs 3 et 9 par l’insuline ainsi que la voie de signalisation de l’insuline au sein de l’amnion. Un test au glycérol tritié a permis l’étude fonctionnelle de l’insuline sur les AQPs. Un inhibiteur de la phosphatidyl-inositol 3-kinase (PI3K) est utilisé pour analyser le signal intracellulaire de l’insuline.L’expression du gène de l’AQP 3 est significativement plus faible dans les groupes DT2 et DG. Au sein d’explants de membranes fœtales non diabétiques, il a été observé au sein de l’amnion (mais pas du chorion), une répression significative par l’insuline de l’expression ARN et protéique des gènes AQPs 3 et 9 qui est bloquée par l’inhibiteur de PI3K. Au sein des membranes fœtales, la répression de l’AQP 3 observée in vivo, est permise par l’hyperinsulinisme connu des patientes atteintes de DT2 ou de DG.
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Thèse
Médecine humaine et pathologie. Université d'Auvergne - Clermont-Ferrand I, 2015. Français. 〈NNT : 2015CLF1MM12〉
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Soumis le : jeudi 16 mars 2017 - 12:16:09
Dernière modification le : mercredi 5 juillet 2017 - 10:18:00
Document(s) archivé(s) le : samedi 17 juin 2017 - 13:44:10

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Damien Bouvier. Aquaporines et membranes foetales chez la parturiente diabétique : Anomalies d'expression et régulation par l'insuline.. Médecine humaine et pathologie. Université d'Auvergne - Clermont-Ferrand I, 2015. Français. 〈NNT : 2015CLF1MM12〉. 〈tel-01491080〉

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